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當前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  試劑盒  >  檢測試劑盒  >  TE0423植物過氧化物酶(POD)檢測試劑盒

植物過氧化物酶(POD)檢測試劑盒

簡要描述:(CAD)檢測試劑盒(肉桂酸比色法),雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:TE0423
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-11-01
  • 訪  問  量:409

詳細介紹

過氧化物酶(peroxisome,POD)是以過氧化氫為電子受體催化底物氧化的酶,主要存在于細胞的過氧化物酶體中,以鐵卟啉為

輔基,可催化過氧化氫,氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用,該酶屬于細胞木質(zhì)素合成途

徑中間的關鍵酶,研究該酶可以探討多種生物細胞發(fā)育過程中木質(zhì)素沉積的代謝機理,為減少水果石細胞含量提高其品質(zhì)提供

依據(jù)。


(CAD)檢測試劑盒(肉桂酸比色法)檢測原理是以愈創(chuàng)木酚(又稱2-甲氧基酚)作為底物,在酶促反應的

最適條件下采用每隔一定時間測定產(chǎn)物生成量的方法,于酶標儀470nm處測定吸光度,以吸光度變化所需酶量進行計算,

主要用于植物組織的裂解液或勻漿液、血清等樣品中內(nèi)源性的過氧化物酶活性,尤其適用于測定水果中過氧化物酶活性。

該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。


操作步驟(僅供參考)

自備材料:

1、蒸餾水

2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管

3、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋、酶標儀、酶標板


操作步驟(僅供參考):

1、準備樣品∶

①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿,4℃ 10000r/min

離心15~20min,留取上清液,-20℃凍存,用于苯丙氨解氨酶的檢測。

②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于苯丙解氨的檢測。

③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液,

-20℃凍存,用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,可以使用蒸餾水或PAL

Lysis Buffer稀釋進行恰當?shù)南♂尅?/span>

2、PAL加樣∶

取96孔板,按照下表設置對照孔、測定孔,溶液應按照順序依次加入,并

注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行孔,

求平均值。

加入物(μl)對照孔測定孔

蒸餾水150100

待測樣本5050

PAL Assay Buffer-50

3、PAL檢測︰

以對照孔為對照(調(diào)零),酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為   A測定0);40℃準確孵育1h,立即加入10μl PAL終止

液終止反應(備選方案),以對照孔為對照調(diào)零,酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1)。

注意︰加入PAL終止液終止反應為非必須步驟,可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調(diào)零,酶標儀立即測定290nm處測定

孔的吸光度。

注意事項∶

1、待測樣品中不能含有酶抑制劑,同時需避免反復凍融。

2、獲得上清液為PAL酶液,應盡快檢測,亦可-20°℃保存。

3、如果沒有可測定紫外區(qū)的酶標儀和酶標板,也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿,但應注意比色杯的最小檢測體積。

4、每次檢測指標不宜過多,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。




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